SHPORA.net :: PDA

[ Back ]

1)Иммуноглобулинами (гамма-глобулинами) называют очищенные и концентрированные

препараты гамма-глобулиновой фракции сывороточных белков, содержащие высокие

титры антител и присутствующие в крови, цереброспинальной жидкости, лимфоузлах,

селезенке, слюне и других тканях. Синтезируются они в лимфоидных клетках,

содержат углеводные группировки и могут рассматриваться как гликопротеины. По

электрофоретической подвиж-ности иммуноглобулины относятся в основном к гамма-

глобулинам и β 2 -глобулинам. Био-логическая роль иммуноглобулинов в организме

связана с участием в процессах иммунитета. Их защитная функция обусловлена

способностью специфически взаимодействовать с анти-генами.

Освобождение от балластных сывороточных белков способствует снижению

токсичности и обеспечивает быстрое реагирование и прочное связывание с

антигенами. Применение гамма-глобулинов снижает количество аллергических реакций

и осложнений, возникающих при введении гетерологичных сывороток. Современная

технология получения человеческого иммуноглобулина гарантирует гибель вируса

инфекционного гепатита. Основным иммуног-лобулином в препаратах гамма-глобулина

является IgG.

Нормальные и специфические иммуноглобулины являются мощным средством

экстренной профилактики и лечения многих заболеваний, прежде всего инфекционных.

В практике здра-воохранения применяют гомологичные (человеческие) и

гетерологичные (лошадиные) им-муноглобулины.

Гомологичные сыворотки или гамма-глобулины человека не вызывают

анафилактических реакций и вводятся однократно.

Важным условием эффективного использования гамма-глобулинов для лечения и

профи-лактики инфекционных заболеваний является как можно более раннее их

назначение с мо-мента заболевания или заражения. Пассивный иммунитет возникает

через несколько часов и длится до двух недель.

Показания к применению

Нормальные и специфические иммуноглобулины являются мощным средством

экстренной профилактики и лечения многих заболеваний, прежде всего инфекционных.

Пассивная иммунизация дает быстрый и хороший эффект, особенно в сочетании с

антибио-тикотерапией. Такой способ иммунопрофилактики используется в качестве

превентивной меры при опасности заражения в эпидемические сезоны и в стрессовых

ситуациях, а также при сепсисе, токсических состояниях.

Специфические иммуноглобулины оказывают не только прямое действие на

возбудителя инфекции, они обладают выраженным неспецифическим иммуномодулирующим

свойством. Оно зависит прежде всего от присутствия в препаратах биологически

активных веществ (ли-зоцим, компоненты системы комплемента, цитокины).

Перспективным источником создания специфических иммуноглобулиновых препаратов

яв-ляются моноклональные антитела, они обладают узкой специфичностью и могут

быть полу-чены в большом количестве.

Получение и контроль качества иммуноглобулинов

Наиболее часто для получения препаратов иммуноглобулина применяют метод Кона,

метод фракционирования белков этиловым спиртом. Используются различные

модификации этого метода, фракционирование проводится при низкой температуре.

Используются дополни-тельные способы фракционирования с целью освобождения

препаратов от пигментов, гона-дотропных гормонов, групповых веществ крови и

других антигенов. Для гарантии исключе-ния вирусной контаминации в современном

производстве применяются дополнительные ме-тоды обезвреживания сывороточных

препаратов: пастеризацию (термическую обработку ма-териалов при 60ºC в течение

10 часов), обработку хлороформом, полиэтиленгликолем, β-пропиолактоном,

ультрафиолетовое облучение.

Препараты иммуноглобулинов контролируются по физико-химическим свойствам на

со-держание общего белка, фрагментированных и агрегированных молекул, на

электрофорети-ческую однородность, степень очистки от балластных сывороточных

белков, на стериль-ность, токсичность, пирогенность, способность к хлопкованию,

наличие HBsAg и антител к вирусу гепатита C и ВИЧ. По российским требованиям

количество фрагментов и агрегатов иммуноглобулина в коммерческих препаратах не

должно превышать 3%, хотя по европей-ской фармакопее этот процент измененных

молекул в препаратах иммуноглобулина может достигать 10.

Нормальный иммуноглобулин, полученный по методу Кона, состоит в основном из

IgG. IgM и IgA остаются в балластных фракциях, хотя они содержат антитела,

играющие важную роль в развитии иммунитета против бактериальных и вирусных

инфекций. При использовании метода Кона IgM и IgA попадают в осадок B, наиболее

опасный в отношении возможной контаминации ретровирусами. В связи с этим для

получения обогащенных препаратов при-меняются дополнительные методы

фракционирования и очистки иммуноглобулинов с по-мощью методов ионообменной

хроматографии, адсорбционной хроматографии, ультра-фильтрации, а также

дополнительные методы их обезвреживания.

Моноклональные антитела - антитела, вырабатываемые иммунными клетками, принадле-

жащими к одному клеточному клону, то есть произошедшими из одной клетки-

предшественницы. Моноклональные антитела распознают и связывают антигены для

распо-знавания специфических эпитопов, которые обеспечивают защиту против

болезнетворных организмов.

Они связывают различные белки, которые влияют на активность клеток, такие как

рецепторы или другие белки, представленные на поверхности нормальных и раковых

клеток. Специ-фичность моноклональных антител позволяет им связывать раковые

клетки и, взаимодействуя с цитотоксическими агентами, такими как сильные

радиоактивы, разрушают раковые клетки, не повреждая здоровые.

Раковые клетки, которые способны реплицироваться бесконечно, сливаются с

клетками млекопитающих, которые продуцируют специфические антитела, что приводит

к образова-нию гибридом, постоянно продуцирующих антитела. Эти антитела называют

моноклональ-ными, которые происходят из одного типа клеток, т.е. из клеток-

гибридом. Антитела, полу-чаемые с помощью традиционных методов, получают из

клеток различного типа и называют поликлональными.

Моноклональные антитела искусственно производят против специфических

антигенов, для связи с антигенами-мишенями. Лабораторное производство

моноклональных антител, осно-ванное на получении антигенов из одной клетки,

позволяет получать идентичные друг другу моноклональные антитела.

При слиянии культур миеломных клеток с антителами клеток селезенки

млекопитающих образуются гибридные клетки/ гибридомы, которые производят

моноклональные антитела в большом количестве. Слияние клеток приводит к

образованию двух типов клеток, один тип способен расти постоянно, другой тип

способен производить чистые антитела в больших ко-личествах. Гибридные клетки

производят только одно лучшее антитело, более чистое, чем поликлональные

антитела, получаемые с помощью традиционных методик. Моноклональные антитела

являются гораздо более эффективными методами, чем традиционные методы лече-ния,

поскольку эти методики воздействуют не только на инородную субстанцию, но и на

собственные клетки организма, что вызывает сильные побочные эффекты.

Моноклональные антитела взаимодействуют только с инородными антителами/

клетками-мишенями, не ока-зывая или оказывая минимальные побочные эффекты.

Присутствие большого количества специфических моноклональных антител в крови

говорит о присутствии в организме аномального белка. Как правило, этот белок

может быть об-наружен в процессе клинического обследования и идентифицирован с

помощью скрининго-вого анализа крови, например, с помощью белкового

электрофореза. Источником аномально-го производства моноклональных антител

является популяция плазматических клеток в ко-стном мозге.

Интерферон – полипептид, вырабатывающийся и аккумулирующийся во всех

ядросодержа-щих клетках крови и эпителиальных клетках слизистых оболочек. Он

является основным звеном противоинфекционной защиты человека. Интерфероны

вырабатываются и выделяются местно, в околоклеточное пространство. Действуют

преимущественно на близлежащие клетки.

В зависимости от типа клеток-продуцентов все интерфероны можно разделить на:

• α-интерфероны. вырабатывается лейко¬цитами и он получил название

лейкоцитар¬ного;

• β-интерфероны. называют фибробластным, поскольку он синтезируется

фибробластами — клетками соединительной ткани,

• γ-интерфероны. иммунным, так как он вырабатывается активированными Т-

лимфоцитами, макрофагами, естественными киллерами, т. е. иммунными клетками.

Механизм действия интерферона сложен. Интерферон непосредственно на вирус вне

клетки не действует, а связывается со спе¬циальными рецепторами клеток и

оказыва¬ет влияние на процесс репродукции вируса внутри клетки на стадии синтеза

белков.

Применение интерферона. Действие интерферона тем эффективнее, чем раньше он

начинает синтезироваться или пос¬тупать в организм извне. Поэтому его

использу¬ют с профилакти-ческой целью при многих ви¬русных инфекциях, например

гриппе, а также с лечебной целью при хронических вирусных инфекциях, таких как

парентеральные гепати¬ты (В, С, D), герпес, рассеянный склероз и др. Интерферон

дает положительные результаты при лечении злокаче-ственных опухолей и

забо¬леваний, связанных с иммунодефицитами.

Интерфероны обладают видоспецифичностью, т. е. интерферон человека менее

эффек¬тивен для животных и наоборот. Однако эта видоспецифичность относительна.

Получение интерферона. Получают интерферон двумя способами: а) путем

инфи¬цирования лейкоцитов или лимфоцитов кро¬ви человека безопасным вирусом, в

результате чего инфици-рованные клетки синтезируют интерферон, который затем

выделяют и конс¬труируют из него препараты интерферона; б) генно-инженерным

способом — путем выра¬щивания в производ-ственных условиях рекомбинантных

штаммов бактерий, способных продуцировать интерфе-рон. Обычно используют

рекомбинантные штаммы псевдомонад, кишечной палочки со встроенными в их ДНК

генами интерферона. Интерферон, получен¬ный генно-инженерным способом, носит

на¬звание рекомбинантного. В нашей стране рекомбинантный интерферон получил

офици¬альное название «Реаферон». Производство этого препарата во многом эф-

фективнее и дешевле, чем лейкоцитарного.

Рекомбинантный интерферон нашел ши¬рокое применение в медицине как

профилак¬тическое и лечебное средство при вирусных инфекциях, новообразованиях и

при иммунодефицитах.

2) Сифилис (устар.: люэс) — хроническое системное венерическое инфекционное

заболева-ние с поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей,

нервной системы с последовательной сменой стадий болезни, вызываемое

микроорганизмом вида Treponema pallidum (бледная трепонема) подвида pallidum,

относящимся к роду трепонем (Treponema), семейству Treponemataceae.Реакция

Вассермана (РВ)

Для пробы на реакцию Вассермана исследуется кровь из локтевой вены. При

заражении больного сифилисом проба на реакцию Вассермана дает положительный

результат не сразу, а только через 6—7 недель.

Исходя из этого, первичный сифилис, как мы уже говорили, принято делить на

сероотрица-тельную (серонегативную) и сероположительную (серопозитивную) стадии.

При сероотрицательной стадии первичного сифилиса отрицательная реакция

Вассермана не может служить показателем отсутствия болезни и для того, чтобы

подтвердить или опро-вергнуть диагноз, используются более точные методы

диагностики.

Положительная реакция Вассермана может быть разной степени выраженности, условно

сте-пень выраженности реакции Вассермана обозначают знаком «+» с определенным

индексом:

1+ 2+ — результат слабо положительный

3+ — положительный

4+ — резко положительный

Анализ на РВ может дать и ЛОЖНЫЕ положительные результаты при беременности,

после перенесенного и полностью вылеченного сифилиса, при некоторых других

обстоятельствах.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Эта проба основана на том, что бледные трепонемы, которые берут от зараженного

сифили-сом кролика, при взаимодействии с сывороткой больного сифилисом человека

дают желто-зеленоватое свечение при микроскопировании в люминесцентном

микроскопе. Если сифили-са у испытуемого человека нет, то свечения не

наблюдается. Если же свечение выявлено, то его интенсивность оценивается так же,

как при пробе на реакцию Вассермана:

1+ или отсутствие свечения — отрицательная проба

2+, 3+, 4+ — положительная проба

Важно то, что РИФ дает положительный результат на более ранних стадиях сифилиса,

чем РВ, из-за ее большей чувствительности.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Эта проба позволяет распознать ложноположительный результат РВ, который иногда

может быть у здорового человека, поэтому обычно при положительном анализе на РВ

его подтвер-ждают или опровергают при помощи анализа на РИБТ.

В некоторых случаях используются и другие методы диагностики, например,

компьютерная томография для диагностирования нейросифилиса, но эти методы не

столь распространены и применяются в редких случаях по решению венеролога.

Точнейшим методом диагностики возбудителя является ПЦР-диагностика( до 95%

точности).

Диагноз сифилиса в ряде случаев можно заподозрить клинически, но основным

методом ди-агностики и подтверждения предварительного диагноза является

серодиагностика. В на-стоящее время для определения антител к возбудителю

используется ИФА, ранее в России для этого применялась реакция Вассермана.[24]

Все методы диагностики сифилиса раздела-ются на следующие группы[24]:

Прямые и непрямые (косвенные)

Трепонемные (специфические) и нетрепонемные (неспецифические)

Отборочные (скрининговые) и подтверждающие (диагностические)

Приборные, бесприборные.

Прямые трепонемные методы диагностики позволяют обнаружить возбудитель

непосредст-венно в биоматериале. Такими методами являются темнопольная

микроскопия, заражение сифилисом кроликов, культуральные методы, ПЦР

диагностика.

Каждый из этих методов имеет свои специфические недостатки которые ограничивают

его массовое применение. Метод темнопольной микроскопии может обнаружить

возбудитель только при свежем сифилисе, и с его помощью невозможно оценить

динамику и эффектив-ность лечения. Методика заражения сифилисом кроликов

является дорогостоящей и медлен-ной, и так же не позволяет в динамике оценивать

состояние больного. Выращивание бледной трепонемы на искусственных средах крайне

затруднительно, в связи с чувствительностью возбудителя к условиям среды. Метод

ПЦР диагностики позволяет эффективно обнаруживать возбудитель только при

первичном и вторичном сифилисе, тест системы относительно дороги и исследования

эффективности данного метода в диагностике сифилиса еще продол-жаются. Таким

образом вы видим, что методы прямой диагностики мало применимы в кли-нической

практики, в связи с чем основой диагностики являются различные серологические

методики (непрямые).[25]

В соответствии с действующим приказом МЗ РФ № 87 от 26.03.2001 «О

совершенствовании серологической диагностики сифилиса» при серо и

ликвородиагностике сифилиса допуска-ется использование следующих реакций.

Микрореакции преципитации (непрямой скрининговый метод)

Реакции пассивной непрямой агглютинации (РПГА)

Реакции иммунофлуоресценции (РИФ)

Реакции иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

3) Анатоксин дифтерийно-столбнячный адсорбированный жидкий (АДС-анатоксина)

Состав. АДС-анатоксин состоит из смеси очищенных дифтерийного и столбнячного

анаток-синов, адсорбированных на гидроксиде аллюминия. Препарат содержит в 1 мл

60 флокули-рующих единиц (ЛФ) дифтерийиого и 20 ангитоксин-связывающих единиц

(ЕС) столбнячно-го анатоксинов. Представляет собой суспензию белого ила слегка

желтоватого цвета, разде-ляющуюся при стоянии на прозрачную жидкость а рыхлый

осадок, полностью разбиваю-щийся при встряхивании.

Выпускается в ампулах по 1,0 мл (две прививочные дозы). В упаковке содержится 10

ампул.

Предназначен препарат д.ля профилактики дифтерии и столбняка у детей до 6-

летнего воз-раста.

Способ введения и дозировка. АДС-анатоксин рекомендуется к применению: детям,

пере-болевшим коклюшем (от 3-месячного до 6-летнего возраста); детям, имеющим

противопока-зания к введению АКДС-вакцины; детям 4-—5 лет включительно, ранее не

привитым против дифтерии и столбняка.

Курс вакцинаций состоит из 2 прививок с интервалом 45дней, вводят препарат

внутримы-шечно. Ревакцинацию АДС-анатоксином проводят однократно через 9—12 мес

после закон-ченного курса вакцинации.

В одной прививочной дозе (0,5 мл) препарат содержит не менее 30 международных

иммуни-зирующих единиц (МИЕ) дмфтерийного анатоксина и не менее 40 МИЕ

столбнячного ана-токсина.

Прививочные реакции. У отдельных привитых в первые двое суток могут развиться

крат-ковременные общие (повышение температуры, недомогание) и местные

(болезненность, ги-перемия, отечность) реакции.

Противопоказания - острые инфекционные и неинфекционные заболевания, туберкулез,

за-болевания сердечно-сосудистой системы, ревматизм, болезни почек и печени.

поджелудоч-ной железы, болезни крови, злокачественные новообразования,

коллагенозы, эндокринные заболевания, аллергические заболевания, тяжелые формы

рахита, недоношенность, нервные психические заболевания, инфекционные

заболевания ЦНС.