SHPORA.net :: PDA | |
Main FAQ гуманитарные науки естественные науки математические науки технические науки Билет №25. 1)Реакции нейтрализации (РН) основаны на способности AT связывать различные возбуди-тели или их метаболиты, лишая тем самым их возможности реализовать свои биологические свойства (иными словами, AT нейтрализуют возбудителей). На практике РН применяют для выявления вирусов и различных токсинов. В определённой степени к ним же относят реакции торможения вирусиндуцированной гемагглютинации и иммобилизации. Реакции нейтрализации токсинов применяется для идентификации бактериальных экзо- токсинов по видовой и типовой их принадлежности, а также для определения содержания ан-титоксинов в исследуемой сыворотке. Принцип основан на способности антитоксинов свя-зывать токсин и блокировать его действие. Для идентификации токсина и определения титра антитоксических AT их смесь вводят лабораторным животным. При соответствии типа ток-сина и антисыворотки гибели животных не наблюдают. Нейтрализацию токсинов in vitro оп-ределяют в реакции флоккуляции. Для определения антитоксического иммунитета у человека часто применяют кожные пробы (например, пробу Шика). Реакция нейтрализации вирусов. В сыворотки крови переболевших лиц циркулируют ан-титела, нейтрализующие вирусы. Их наличие выявляют смешиванием культуры возбудителей с сывороткой с последующим введение лабораторному животному или заражением культуры клеток. На эффективность нейтрализации указывает выживание животного либо отсутствие гибели клеток в культурах. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА). Рис. 8. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) (схема). Принцип реакции основан на способности АТ связывать различные вирусы и нейтрализовать их, лишая возможности агглютинировать эритроциты. Визуально этот эффект и проявляется в «торможении» гемагглютинации. РТГА применяют при диагностике вирусных инфекций для выявления специфических антигемагглютининов и идентификации различных вирусов по их гемагглютининам, проявляющим свойства Аг. Типирование вируса проводят в реакции РТГА с набором типоспецифических сывороток. Результаты реакции учитывают по отсутствию гемагглютинации. Подтипы вируса типа А с антигенами H0N1, H1N1, H2N2, H3N2 и другие могут быть дифференцированы в РТГА с на-бором гомологичных типоспецифических сывороток Исследуемый материал содержит вирус гриппа тип А с антигеном H3N2 Определение титра антител крови больного по РТГА Развернутая РТГА проводится в лунках пластмассовых пластин. В лунках готовят 2-х кратные разведения исследуемой сыворотки в объеме 0,25 мл, добавляют по 0,25 взвеси ви-руса в рабочем разведении и инкубируют 2 ч при температуре 37°С. Затем добавляют по 0,5 мл 1% взвеси куриных эритроцитов, инкубируют еще 2 ч и оценивают результат по феномену гемагглютинации. При положительной РТГА образуется плотный осадок эритроцитов на дне лунки в виде диска или кольца с ровными краями. Титр антител определяют по последней лунке с положи-тельной РТГА. Результаты реакции нейтрализации выделенных от больных вирусов с моновалент- ными иммунными сыворотками к вирусам полиомиелита I-III типов. Выделение энтеровирусов из исследуемого материала осуществляют путем заражения кле-точных культур. Индикацию вирусов проводят по цитопатогеному действию (ЦПД): на 2-3-й день инкубации при 35°С наблюдается полная или частичная дегенерация клеток. Основным методом идентификации выделенного вируса является серотипирование в реакции нейтрали-зации. С этой целью материал из чистой культуры выделенного вируса обрабатывают смесью диагностических моновалентных сывороток к различным серотипам энтеровирусов. При этом в начале определяют тип вируса, затем его принадлежность к определенному серотипу. Реакция нейтрализации вирусов в культуре клеток: А - цитопатогенный эффект (ЦПЭ) или цитопатогенное действие (ЦПД) в результате размно-жения вирусов; Б - ЦПЭ отсутствует в результате предварительной нейтрализации вирусов антителами. 2)Возбудитель клещевого энцефалита относится к семейсиву Flaviviridae роду Flavivirus. На основе эпид анамнеза и клинических проявлений,характерных для клещевого энцефалита. Материалом для исследования служит кровь и цереброспинальная жидкость больного, так же можно взять боиптаты внутренних органов и г.м умерших новорожденных белых мышей и культур кл-к. Идентификацию в суспензиях мозга мышей и культуральной жидкости про-водят в РТГА, РН, РСК, а в монослое культур кл-к в РИФ. Обнаруживают АТ в парных сы-воротках и цереброспинальной жидкости с помощью РСК и РТГА и др серологич реакциях. Экспресс-диагностика основана на обнаружении вирусного АГ в крови с помощью РНГА и ИФА, выявление IgМ АТ на первой неделе заб-ия в цереброспиналь жидкости и РНК-вируса в крови и цереброспин жидк-ти у людей, в клещах и внутр орг-в жив-х с помощью ПЦР. Для лечения и экстренной проф-ки у непривитых лиц и привитых,получивших множествен-ные укусы, применяют специфический гомологичный донорский иммуноглобулин против клещ энцефалита, полученный из плазмы доноров. Серотерапию назначают не позднее 3-4 дня заболевания. Или специфич гетерологичный лошадиный иммуноглобулин. 3) Вакцина бруцеллезная живая сухая. Состав. Вакцина представляет собой лиофилизированную живую культуру вакцинного штамма Вг. abortus 19-ВА. Выпускается в ампулах во 1,0 мл (5-10 доз), по 5 ампул в упаковке, имеет вид однородной аморфной или кристаллической массы белого или желтоватого цвета. Назначение. Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза козье - овечьего вида у взрослых с 18 лет. Обеспечивает развитие иммунитета продолжительностью 10 —12 мес. Способ введения и дозировка. Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно, ревакцинацию — накожно, интервал между прививками составляет 10— 12 мес. Для вакци-нации накожным способом препарат вводят в наружную поверхность средней трети плеча. 2 капли вакцины наносят на расстоянии 30 - 40 мм друг от друга, кожу натягивают и стериль-ным оспопрививателем пером производят через каждую каплю 6 насечек. При ревакцинации применяют половинную дозу, т. е. наносят 1 каплю, через которую делают 6 насечек. Для вакцинации подкожным способом препарат вводят по 1 мл в область наружной поверхности плеча. Прививочная доза препарата в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации. Прививочные реакции. Местная и общая реакции на вакцинацию незначительны. Местная реакция может появиться через 24—48 часов в виде гиперемии и инфильтрата кожи. Общая реакция возникает в первые сутки у 1-2% привитых и выражается недомоганием, головной болью, повышением температуры тела до З7,5——38 °С. Противопоказания — острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения или декомпенсации, аллергические заболевания, коллаге-нозы, болезни крови, беременность, переболевшие бруцеллезом (положительная серологиче-ская или аллергическая реакция на бруцеллез), лечение стероидными гормонами, антимета-болитами, рентгенотерапия, злокачественные новообразования. |