SHPORA.net :: PDA | |
Main FAQ гуманитарные науки естественные науки математические науки технические науки Билет №13. 1) В процессе взаимодействия с АГ участвует лишь антигенсвязывающий центр (паратоп), который локализован в Fab-фрагменте. АТ взаимодействует не со всей молекулой АГ сразу, а лишь с ее антигенной детерминантой (эпитопом). АТ отличает специфичность взаимодействия, т.е. способность связываться со строго опре-деленной антигенной детерминантой. [АГ]+[АТ] =[ИК] Важное значение имеют особенности АТ и АГ, а также условия, в которых происходит их взаимодействие. По сравнению с ковалентными связями силы нековалентного межмолекулярного взаимодей-ствия по отдельности весьма слабы, однако при большом числе слабых взаимодействий сум-марная энергия связывания получается значительной. Сила нековалентной связи зависит прежде всего от расстояния между взаимодействующими химическими группами. Свойства АТ: 1.Антигенность АТ Ig обладает антигенностью и выраженной иммуногенностью. В молекуле иммуноглобулина различают 4 типа антигенных детерминант: видовые, изотипические, аллотипические и идиотипические. Видовые детерминанты характерны для иммуноглобулинов всех особей данного вида, оп-ределяются строением L- и H-цепей. Изотипические детерминанты являются групповыми, локализуются в Н-цепи и служат для дифференцировки семейства иммуноглобулинов на 5 изотипов (классов) и множество под-классов. Аллотипические детерминанты являются индивидуальными, располагаются в L- и H- цепях. Идиотипические детерминанты отражают особенности строения антигенсвязывающего центра молекулы Ig, образованы V-доменами L- и H-цепи. 2.Аффинность – прочность связи одного антигенсвязывающего центра с индивидуальным эпитопом АГ. Зависит от степени стерического (пространственного) соответствия (комплементарности) структуры антигенсвязывающего центра и эпитопа. Наибольшим аффинитетом обладают моноклональные антитела, наименьшим – нормальные антитела. Аффинность антител существенно меняется в процессе иммунного ответа в связи с селекцией наиболее специфичных клонов В-лимфоцитов. 3.Авидность – это прочность связывания АТ и АГ (суммарная сила). Определяется аффинностью и числом антигенсвязывающих центров. При равной аффинности наибольшей авидностью обладают антитела класса М, так как они имеют 10 антигенсвя-зывающих центров. Поливалентность АГ и АТ существенно усиливает прочность их соединения, поскольку для диссоциации иммунных комплексов необходим разрыв сразу всех связей. Применительно к физиологическим условиям более адекватно рассматривать авидность, а не аффинность АТ, поскольку природные АГ обычно поливалентны. 4. Эффективность взаимодействия АГ и АТ Большое значение имеют стерическая (пространственная) доступность эпитопа для антиген-связывающего центра Ig и число эпитопов в составе молекулы антигена. Условия реакции: рН среды, осмотическая плотность, солевой состав и температура среды. Наиболее приемлемые – физиологические условия внутренней среды макроорганизма: близ-кая к нейтральной реакция среды, присутствие фосфат-, карбонат-, хлорид- и ацетат-ионов, осмолярность физиологического раствора, температура 36—37 °С. Специфичность антисыворотки суммарно отражает специфичность содержащихся в ней АТ, в популяции которых может присутствовать множество паратопов, способных связываться с различными эпитопами или даже с разными частями одного и того же эпитопа. Если АГ А имеет общие эпитопы с АГ В, часть АТ, специфичных к А, будет реагировать также и с В. Этот феномен назван перекрестной реактивностью Ig – бифункциональная молекула: одна его часть предназначена для связывания с АГ, дру-гая осуществляет эффекторные функции. Cвязывание с АГ : • маркирование АГ, инактивация биологически активных молекул (токсинов), опсонизация АГ, антителоопосредованный лизис клеток, иммунный фагоцитоз, ГНТ; • функция антигенспецифического рецептора на поверхности В-лимфоцитов; Эффекторные функции: • связывание с тканями организма, различными клетками иммунной системы, определен-ными фагоцитарными клетками и компонентом комплемента С1q при активации по класси-ческому пути; • рецепторы для Ig присутствуют на мононуклеарных лейкоцитах, нейтрофилах, НК-клетках, эозинофилах,базофилах, тучных клетках; • перекрестная сшивка АГ АТ, связанных с рецепторами, инициирует биологическую ак-тивность клетки (фагоцитоз, зависимая от АТ клеточная цитотоксичность, высвобождение медиаторов и презентация АГ). Нормальные антитела В сыворотке крови человека всегда определяется базальный уровень иммуноглобулинов, ко-торые получили название нормальных, или естественных, антител. К нормальным антителам относят изогемагглютинины — антитела, направленные против эритроцитарных антигенов групп крови (система АВО), а также против бактерий кишечной группы, кокков и некоторых вирусов. Эти антитела постоянно образуются в организме без явной антигенной стимуляции. С одной стороны, они отражают готовность макроорганизма к иммунному реагированию, а с другой — могут свидетельствовать об отдаленном контакте с антигеном. Моноклональные антитела Каждый B-лимфоцит и его потомки (клон), способны синтезировать антитела строго опреде-ленной специфичности – моноклональные (МКАТ). Д. Келлер и Ц. Мильштайн (1975) получили гибридные клетки путем слияния иммунных B-лимфоцитов с миеломной клеткой. Гибридомы обладали специфическими свойствами ан-тителопродуцента и «бессмертием» раково-трансформированной клетки. Гибридома хорошо размножается на искусственных питательных средах и в организме животных, в неограни-ченном количестве продуцируют АТ. МКАТ широко применяются при создании диагностических и лечебных препаратов Полные и неполные антитела Деление основано на способности образовывать в реакции агглютинации или преципитации (in vitro) хорошо различимую глазом макромолекулярную структуру гигантского иммунного комплекса. Таким свойством обладают полные антитела. К ним относятся полимерные мо-лекулы IgМ, а также некоторые IgА и IgG. Неполные антитела лишены такой способности несмотря на то, что они специфически свя-зываются с антигеном. В связи с этим их еще называют непреципитирующими (или блоки-рующими) антителами. Причиной данного явления могут быть экранирование или дефект второго антигенсвязывающего центра мономерной молекулы иммуноглобулина, а также не-достаточное число или экранирование антигенных детерминант на молекуле антигена. Выявить неполные антитела можно при помощи реакции Кумбса — путем использования «вторых», антииммуноглобулиновых антител. Динамика антителопродукции На проникновение АГ иммунная система реагирует усилением биосинтеза специфических АТ, что достигается путем размножения клонов АОК. Преимущества получают клоны с наи-большей аффинностью рецепторных молекул Ig. Параллельно с размножением идет процесс дифференцировки B-лимфоцитов. Наблюдаются перестройка в геноме клеток и переключе-ние биосинтеза с крупной высокоавидной молекулы IgМ на более легкие и экономичные вы-сокоаффинные IgG или IgА. В латентную фазу антителопродукция остается на базальном уровне. В этот период проис-ходят переработка и представление АГ иммунокомпетентным клеткам, запуск пролиферации антигенспецифичных клонов АОК. Параллельно происходит созревание пре-B-лимфоцитов, дифференцировка в плазматические клетки и переключение синтезируемых изотипов Ig. По-пытка повторного введения антигена в латентной фазе может привести к иммунологическому параличу. Во время логарифмической фазы наблюдается интенсивный прирост числа антигенспеци-фичных B-лимфоцитов, нарастание специфических АТ. В стационарной фазе количество специфических антител и синтезирующих их клеток дос-тигает максимума и стабилизируется. Освобождение макроорганизма от антигена устраняет антигенный стимул, и начинается фаза снижения: постепенное уменьшение клонов специ-фических АОК и титров соответствующих АТ. При первичном контакте с антигеном развивается первичный иммунный ответ: длительная латентная (3 – 5 сут) и логарифмическая (7 – 15 сут) фазы. Первые диагностически титры АТ регистрируются на 10 – 14-е сутки. Стационарная фаза – 15 – 30 сут, а фаза снижения – 1 – 6 мес. В итоге первичного иммунного реагирования формируются многочисленные клоны антиген-специфичных антителопродуцирующих клеток (B-лимфоциты иммунологической памяти), а во внутренней среде макроорганизма в высоком титре накапливаются специфические IgG и/или IgА. Повторный контакт иммунной системы с тем же антигеном ведет к формированию вторич-ного иммунного ответа: укороченная латентная фаза – от нескольких часов до 1 – 2 сут. Логарифмическая фаза отличается более интенсивной динамикой прироста и более высокими титрами АТ. Стационарной фазе и фазе снижения свойственна затяжная динамика (несколько месяцев или даже лет).При вторичном иммунном ответе в организме сразу же синтезируется IgG. 2) Нет,необходимо было взять и кровь для исследоваения(серология) Микробиологическая диагностика. Бактериоскопический метод: окраска по Граму мазков из патологического материала может быть полезна для предварительного диагноза инфекций, вызванных стрептококками группы А. Определение стрептококковых антигенов в патологическом материале (из респираторного тракта) с помощью ИФА или латекс-агглютинации. Бактериологический метод: проводят идентификацию мелких блестящих ко-лоний, выросших на кровянном агаре. Серологический метод: определяют антитела против стрептококка группы А (антистрептолизин 0, против ДНК-азы и других антигенов). Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на кровяной агар в чашку Петри. После инкубации при 37°С в течение 24 ч изучают характер колоний и наличие вокруг них зон гемолиза. Из части материала, взятого из колоний, готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Для получения чистой культуры 2—3 подозрительные колонии пересевают в пробирки со скошенным кровяным агаром и сахарным бульоном. На кровяном агаре Str. pyogenes образуют мелкие, величиной с булавочную головку, мут-новатые круглые колонии. В бульоне стрептококк в отличие от стафилококка дает придонно-присте-ночный рост в виде хлопьев или зерен, оставляя всю среду прозрачной. По характеру гемолиза на кровяном агаре стрептококки делят на три группы: 1) негемоли-тические; 2) а-гемолитические, или зеленящие, образующие зеленоватую зону частичного гемолиза; 3) р-гемолитические, образующие вокруг колонии полностью прозрачную зону ге-молиза. Заключительным этапом бактериологического исследования является идентификация выде-ленной культуры по антигенным свойствам . Серогруппу стрептококков определяют в реак-ции преципитации с полисахаридным приципитиногеном С, выделенным из исследуемой культуры, и сыворотками (обычно четырех наиболее распространенных серогрупп: А, В, С и D .Серовар стрептококков определяют в реакции агглютинации. Развернутое серологическое исследование и типирование стрептококков проводят главным образом при эпидемиологиче-ском обследовании. Выделенную культуру стрептококка проверяют на чувствительность к антибиотикам методом дисков . При подозрении на сепсис делают посевы крови больного . Инкубируют посевы длитель-ный срок (до 3 нед). Серодиагностика. При отдельных нозологических формах ^стрептококковой инфекции с помощью РСК или реакции преципитации устанавливают наличие специфических антигенов в крови больного. Антитела к О-стрептолизину определяют главным образом для подтвер-ждения диагноза ревматизма. Реакция основана на нейтрализации способности О-стрептоли-зина растворять эритроциты в случае наличия в крови больного соответствующих антител. Реакцию ставят со стандартным сухим О-стрептолизином. 3) Иммуноглобулин человека нормальный. Состав – 10%-ный раствор иммунологически активной фракции сыворотки крови человека. Содержание иммуноглобулина G составляет не менее 97% от общего белка. Препарат не со-держит биологически активных примесей, консервантов и антибиотиков. Вирусологически безопасен. Выпускается в ампулах по 1,5 мл в жидком виде. Назначение – для профилактики гепатита А, кори, гриппа, коклюша, менингококковой ин-фекции, полиомиелита, повышения резистентности организма в период реконвалесценции после инфекционных заболеваний. Действующим началом препарата являются иммуногло-булины, обладающие активными антителами различной специфичности. Способ применения и дозировка. Препарат вводят внутримышечно. Доза и кратность вве-дения зависит от показаний к применению. Профилактика гепатита А – препарат вводится однократно в дозах: детям дошкольного возраста 0,75 мл, остальным возрастным группам, в том числе беременным женщинам 1,5 мл. Профилактика кори – препарат вводится однократно детям с 3-месячного возраста, не бо-левшим корью и не привитым против этой инфекции, не позднее 6 суток после контакта с больным. Доза препарата 1,5 мл или 3,0 мл в зависимости от состояния здоровья ребенка и времени, прошедшего с момента контакта. Взрослым и детям при контакте со смешанными инфекциями препарат вводят в дозе 3,0 мл. Профилактика и лечение гриппа: препарат вводят однократно в дозах: детям до 2-х лет — 1,5 мл, от 2 до 7 лет —3 мл, старше 7 лет и взрослым — 4,5-6 мл. При лечении тяжелых форм гриппа показано повторное (через 24—48 час) введение иммуноглобулина в той же дозе. Профилактика коклюша: препарат вводят двукратно с интервалом 24 часа в дозе 3,0 мл де-тям, не болевшим коклюшем (подлежат профилактике дети первого года жизни; в возрасте от 1 года до 6 лет, не привитые против коклюша), ослабленным детям. Профилактика менингококковой инфекции: вводят однократно детям в возрасте от 6 ме-сяцев до 7 лет в дозах 1,5—3,0 мл. Профилактика полиомиелита: препарат вводят однократно в дозах 3,0—6,0 мл неприви-тым или неполноценно привитым полиомиелитной вакциной детям. Прививочные реакции на введение иммуноглобулина, как правило, отсутствуют. Противопоказано введение препарата лицам, имевшим в анамнезе тяжелые аллергические реакции. |