SHPORA.net :: PDA

[ Back ]

1) Фагоцитоз (от греч. phagos — пожираю, cyios — клетка), открытый и изученный

И.И.МечниковымюМеханизм фагоцитоза состоит в поглощении, переваривании, инак-

тивации инородных для организма веществ специализированными клетками — фагоци-

тами. К фагоцитирующим клеткам И.И.Мечников отнес макрофаги и микрофаги. В на-

стоящее время все фагоциты объединены в единую мононуклеарную фагоцитирующую

систему. В нее включены тканевые макрофаги (альвеолярные, перитонеальные и др.),

клетки Лангерганса (белые отро-стчатые эпидермоциты) и Гренштайна (эпидермоциты

кожи), клетки Купфера (звездчатые ретикулоэндотелиоциты), эпители-оидные клетки,

нейтрофилы и эозинофилы крови и др.

Функции фагоцитов очень обширны. Фагоциты 1) удаляют из организма отмирающие

клетки и их структуры (эритроциты, раковые клетки); 2) удаляют

неметаболизируемые неорганические вещества, попадающие во внутреннюю среду

организма тем или иным путем (например, частички угля, минеральную и другую

пыль, проникающую в дыха-тельные пути); 3) поглощают и инактивируют микробы

(бактерии, вирусы, грибы), их останки и продукты; 4) синтезируют разнообразные

биологически активные вещества, необходимые для обеспечения резистентности

организма (некоторые компоненты ком-племента, лизоцим, интерферон, интерлейкины

и др.); 5) участвуют в регуляции иммун-ной системы; 6) осуществляют

«ознакомление» 7-хелперов с антигенами. Следователь-но, фагоциты являются, с

одной стороны, своеобразными «мусорщиками», очищающими организм от всех

инородных частиц независимо от их природы и происхождения (неспе-цифическая

функция), а с другой стороны, участвуют в процессе специфического имму-нитета

путем представления антигена иммунокомпетентным клеткам (Т- и В-лимфоцитам) и в

регуляции их активности.

Процесс фагоцитоза, стадий: 1) приближение фагоцита к объекту поглощения

(хемотак-сис); 2) адсорбция поглощаемого вещества на поверхности фагоцита; 3)

поглощение ве-щества путем инвагинации клеточной мембраны с образованием в

цитоплазме фагосомы, содержащей вещество; 4) слияние фагосомы с лизосомой клетки

с образованием фаголи-зосомы; 5) переваривание вещества в фаголизосоме с помощью

ферментов.

Для осуществления своих функций фагоциты имеют рецепторный аппарат и набор лити-

ческих ферментов. На цитоп-лазматической мембране находятся, например, рецепторы

для компонентов комплемента, Fс-фрагментов иммуноглобулинов, а также антигены

гис-тосовместимости I и II классов. Внутриклеточные лизосомы содержат около 40

различ-ных ферментов, способных «переварить» практически любое вещество.

1.хемотаксисом (от греч. chymeia — искусство сплавления металлов и taxis —

располо-жение, построение). Это АТФ-зави-симый процесс, в котором участвуют

сократительные белки актин и миозин. К хемоаттрактантам относятся, например,

фрагменты компонентов комплемента (СЗа и С5а), некоторые лимфоки-ны, продукты

распада клеток и бактерий.

2.Адсорбция вещества на поверхности фагоцита осуществляется за счет слабых

химиче-ских взаимодействий и происходит либо спонтанно, неспецифически, либо

путем связы-вания со специфическими рецепторами (для иммуноглобулинов,

компонентов компле-мента). «Захват» фагоцитом вещества вызывает выработку

большого количества пере-кисных радикалов («кислородный взрыв»), которые

вызывают необратимые летальные повреждения как цельных клеток, так и отдельных

молекул.

3.Поглощение адсорбированного на фагоците вещества происходит путем эндоцитоза.

Это энергозависимый процесс, связанный с преобразованием энергии химических

связей молекулы АТФ в сократительную активность внутриклеточных актина и

миозина. Окру-жение фагоцитируемого вещества двуслойной ци-топлазматической

мембраной и образо-вание изолированного внутриклеточного пузырька — фагосомы

напоминает «застегива-ние молнии». Внутри фагосомы продолжается атака

поглощенного вещества перекисны-ми радикалами.

4.После слияния фагосомы и лизосомы и образования в цитоплазме фаголизосомы про-

исходит активация лизосомных ферментов. Эти ферменты разрушают поглощенное ве-

щество до элементарных составляющих, пригодных для дальнейшей утилизации для

нужд самого фагоцита. 5.При этом случайный небольшой фрагмент перевариваемого

вещества (размером до 9 аминокислот) может быть включен в молекулу антигена гис-

тосовместимости II класса и в ее составе выставлен (экспрес-сирован) на

поверхности фа-гоцита для «ознакомления» с ним Т-хелперов. Непереваренные

остатки вещества «хоро-нятся» вместе с погибшим от старости фагоцитом.

Ферментативное расщепление вещест-ва может также происходить вне-клеточно при

выходе ферментов за пределы фагоцита.

Фагоциты, как правило, «переваривают» захваченные бактерии, грибы, вирусы,

осущест-вляя таким образом завершенный фагоцитоз. Однако иногда этот процесс

бывает неза-вершенным: поглощенные бактерии (например, гонококки) или вирусы

(например, воз-будители ВИЧ-инфекции, натуральной оспы) блокируют ферментативную

активность фагоцита, не погибают, не разрушаются и даже размножаются в

фагоцитах. Такой про-цесс назван незавершенным фагоцитозом.

Процесс фагоцитоза активируется под влиянием антител-опсонинов, адъювантов,

комплемента, иммуноцитокинов (ин-терлейкин-2) и других факторов. Механизм

активи-рующего действия антител основан на связывании комплекса антиген-антитело

с рецеп-торами для Fc-фрагментов иммуноглобулинов на фагоцитах. Аналогично

действует ком-племент, который способствует связыванию на специфических для него

рецепторах фа-гоцита (С-рецепторы) комплекса антиген—антитело. Ацъюванты

укрупняют молекулы антигена и таким образом облегчают процесс его поглощения,

так как активность фаго-цитоза зависит от величины поглощаемой частицы.

Оценка фагоцитарной активности лейкоцитов.

Для оценки фагоцитарной активности лейкоцитов периферической крови к цитратной

крови, взятой из пальца или локтевой вены, добавляют взвесь инактивированной

микроб-ной культуры с концентрацией 2 млрд микробов в 1 мл. Смесь инкубируют 30

минут при 37ºС, центрифугируют при 1500 об/мин, удаляют надоосадочный слой, с

помощью пи-петки Пастера осторожно отсасывают серебристый слой лейкоцитов,

готовят мазки, фик-сируют спирто-эфирной смесью, красят по Романовскому-Гимзе и

микроскопируют. Подсчет фагоцитированных микробных клеток ведут в 200

нейтрофилах (50 моноцитах), рассчитывают фагоцитарный индекс (процент

фагоцитирующих лейкоцитов) и фагоци-тарное число (среднее число микробов,

поглощенных одним активным фагоцитом). По-лученные данные сравнивают с нормами

Интенсивность реакции фагоцитоза для че-ловека в норме

(нейтрофилы)

Показатели Дети Взрослые

Фагоцитарный индекс, % 60 75–80

Фагоцитарное число 12 14–15

Показатель завершенности фагоцитоза, % 50 55–60

НСТ-тест (индекс активно-сти нейтрофилов) 0,1–0,15 0,1–0,15



НСТ-тест

В качестве косвенного показателя бактерицидности фагоцитирующих клеток оценивают

интенсивность окислительного взрыва в фагоцитах по способности восстанавливать

жел-тый краситель нитросиний тетразолий (НСТ) с формированием в цитоплазме

клеток осадка темно-синео формазана (учитывают долю формазан-положительных

клеток в процентах). При инкубации лейкоцитов здоровых людей только с красителем

доля формазан-положительных клеток обычно не превышает 1–2 %, в присутствии

индукторов окислительного взрыва (клеток микроорганизмов, бактериальных

липополисахаридов и др.) может достигать 100 %. Снижение доли формазан-

положительных клеток свидетельствует о дефектности кислородзависимого механизма

бактерицидности фагоцитов.

2)Гонококк род Neisseria вид gonorrhoeae.Методы

Острая гонорея, ведущий метод – микроскопический. Из исследуемого материала

делают два мазка, один окрашивают по Граму, другой – метиленовым синим. При

наличии в маз-ке гонококков видны грам- диплококки, расположенные внутри

лейкоитов (незавершен-ный фагоцитоз). При хронической гонорее гонококки нах. вне

клеток, и имеют атипичную форму в виде шаров или мелких образований. Поэтому для

диагностики хронической гонореи применяют серологический метод (РСК, РПГА),

бактериологический метод. Бактериологическое исследование. Материал засевают на

чашки Петри со специ-альными питательными средами — КДС, сывороточным агаром и

др. Среда КДС содер-жит питательный агар с добавлением казеина, дрожжевого

экстракта и сыворотки крови. Посевы инкубируют при 37 "С в атмосфере с

повышенным содержанием СО2 (не менее 3 %) в течение 24—72 ч. Гонококки образуют

круглые прозрачные колонии, напоминаю-щие капли росы. Подозрительные колонии

пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур,

которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах "пестрого" ряда

(полужидкий агар с сывороткой и углеводом) или с помощью микротест-систем.

Гонококки ферментируют только глюкозу с образованием кислоты. Серологический

диагноз ставят с помощью РСК. Реакция ставится для обна-ружения антител в

сыворотке крови больного, с помощью известного антигена, которое представляет

собой взвесь убитых гонококков.Учет результата реакции начинают с кон-трольных

пробирок. При наличии гемолиза в контрольных пробирках, о результатах опы-та

судят по опытной пробирке.

3)ТУЛЯРИН, биологический препарат, применяемый для аллергич. диагностики

туляремии, взвесь в глицерино-физиологич. р-ре убитых при t 70 °С бактерий. Пре-

парат вводят (0,3—0,5 мл) внутрикожно. При положит. результате на месте введения

Т. наблюдают гиперемию и отёк.